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HOXA9在子宫内膜异位症相关卵巢癌中的表达及意义

来源:论文帮手 作者: 发布日期:2017-12-09 11:37:45

摘要
目的: 探讨HOXA9在子宫内膜异位症相关卵巢癌中的表达和意义。 
    方法: 采用免疫组织化学法检测20例子宫内膜异位症相关卵巢癌 、25 例子宫内膜异位症中HOXA9 的蛋白表达水平,并选用及27例正常卵巢组织作为对照。采用免疫组织化学法检测16例卵巢透明细胞癌和29例卵巢子宫内膜样癌HOXA9的表达水平,比较两者与20例子宫内膜异位症相关卵巢癌HOXA9蛋白阳性表达率的差异。
    结果: HOXA9在正常卵巢组、巧囊组及巧囊恶变组中的阳性表达率依次递增,且差异具有统计学意义(2 =28.445,P<0.001)。卵巢透明细胞癌、卵巢子宫内膜样癌与子宫内膜异位症相关卵巢癌的HOXA9蛋白阳性表达率差异无统计学意义(P>0.05)。
    结论: HOXA9可能与卵巢子宫内膜异位症的发生与恶变有关。
关键词: HOXA9 子宫内膜异位症 恶变 子宫内膜异位症相关卵巢癌 
                       
                       Abstract
Objective: To investigate the expression and significance of HOXA9 in endometriosis associated ovarian carcinoma.
Methods: The protein expression of HOXA9 was detected with immunohistochemistry in 20 cases of endometriosis associated ovarian carcinoma、25 cases of endometriosis, and 27 cases of normal ovarian were selected as control group。The protein expression of HOXA9 was detected with immunohistochemistry in 16 cases of clear-cell ovarian carcinomas and 29 cases of ovarian endometrioid carcinomas,ovarian endometrioid carcinomas, clear-cell ovarian carcinomas,to find the different of positive rate between these kinds of ovarian cancer and endometriosis associated ovarian carcinoma.
Results: The positive rate of HOXA9 expression in EAOC group was significantly higher than that in EMs group and normal ovarian group(2 =28.445,P<0.001).The positive rate of HOXA9 expression in ovarian endometrioid carcinomas, ovarian clear cell carcinomas was significantly different with that in endometriosis associated ovarian carcinoma(P>0.05).
Conclusion: The expressions of HOXA9 might be involved in development and malignant transformation of ovarian endometriosis.
Key words: HOXA9,endometriosis ,malignant, Endometriosis Associated Ovarian Carcinoma
 
 
英文缩略语
 
缩略语 英文全称 中文全称
EMs Endometriosis   子宫内膜异位症
OEC Ovarian Endometriotic cysts 卵巢子宫内膜异位囊肿
EAOC Endometriosis associated ovarian carc-
inoma 子宫内膜异位症相关卵巢癌
OCCC Ovarian Clear Cell Carcinomas 卵巢透明细胞癌
OEC Ovarian Endometrioid Carcinomas 卵巢子宫内膜样癌
 
目  录
摘要 I
Abstract II
英文缩略语 III
(题目)
1 前言 1
2 材料与方法 2
2.1 标本采集和处理 2
2.2 主要试剂 2
2.3 试验方法 2
2.4 统计学分析 2
3 结果 3
4 讨论 6
结论 8
本研究创新性的自我评价 9
参考文献 10
文献综述 13
攻读学位期间取得的研究成果 18
致谢 19
个人简历 20
 
 
1 前言
   子宫内膜异位症(EMs)是指具有生长功能的子宫内膜组织,包括腺体和间质,出现在子宫腔被覆内膜及宫体肌层以外的其他部位。这是一种常见的妇科疾病,发病率高达10% ,且有明显升高趋势[1]。虽然EMs是一个良性疾病,但其却与恶性肿瘤有相似特性,如细胞浸润,新生血管,扩张持续生长、抗凋亡、潜在的转移和慢性炎症的发生[2]。自1925 年 Sampson 首次报道了子宫内膜异位症恶变后,不断有研究报道这类恶性肿瘤。目前研究表明卵巢子宫内膜异位症恶变率为 0.7–2.5[3],即在卵巢内子宫内膜异位症基础上发生的恶性肿瘤。这类卵巢癌被称为子宫内膜相关卵巢癌(endometriosis associated ovarian carcinoma,EAOC),主要病理类型为子宫内膜样腺癌 ( Ovarian Endometrioid Carcinomas, OEC) 和透明细胞癌 (Ovarian Clear Cell Carcinomas, OCCC)。近来,随着基因组学和生物信息学的发展,众多研究从遗传、分子、发生率等多层面验证了EMs和卵巢癌的关联[4,5 ]。但是目前为止,恶变病因仍不是很清楚。
  HOX基因是同源异形盒基因家族的一个亚家族,在进化上高度保守,可通过序列特异性DNA结合活性,参与调控胚胎发育和细胞分化。HOXA9基因为A簇HOX基因,其编码的蛋白是参与调控胚胎发育和细胞分化的重要调节因子。很多研究报道了HOXA9 在肿瘤中的异常表达,并推测与肿瘤的发生、侵袭转移及预后密切相关,可作为多种肿瘤的诊断标志物。在卵巢癌中,有研究显示HOX家族成员与在发生中起重要作用,并参与细胞增殖、凋亡及DNA修复[6]。
  本文通过免疫组织化学方法检测HOXA9在子宫内膜异位症相关卵巢癌、卵巢子宫内膜异位症及正常卵巢组织中的表达,探讨HOXA9在子宫内膜异位症相关卵巢癌中的表达及意义,进一步探讨其在EMs恶变中的作用,为EMs恶变的临床诊治提供参考。同时,由于目前很多研究表明卵巢子宫内膜样癌和卵巢透明样癌可能来源于EMs恶变,本文另通过免疫组织化学方法检测HOXA9在卵巢子宫内膜样癌和卵巢透明样癌中的表达。
 
 
 
 
2 材料与方法
2.1 标本采集和处理
   收集2010-2016年作者医院收治的子宫内膜异位症相关卵巢癌20例,巧囊25例,卵巢子宫内膜样癌29例,卵巢透明细胞癌16例和正常卵巢组织(输卵管积水和CINII-III)27例。收集上述病例,经10%中性福尔马林固定,石蜡包埋,切片,4-5µm厚。病理标本均经相关医师证实。 
2.2 主要试剂
兔多克隆抗体HOXA9从美国abcam公司购买,二抗试剂盒从迈新生物技术开发公司购买,DAB显色液自中杉金桥购买等。
 
2.3 试验方法
①应用免疫组织化学染色的方法检测正常卵巢组织中HOXA9的表达定位及表达量。②应用免疫组织化学染色的方法检测巧囊、子宫内膜异位症相关卵巢癌、卵巢子宫内膜样癌及卵巢透明细胞癌的病变卵巢组织中 HOXA9表达情况,探讨其在卵巢子宫内膜相关性疾病中的表达和意义。
染色结果判定:①染色程度评分标准:无着色,0分;淡黄色,1分;棕黄色,2分;棕褐色,3分。②染色面积评分标准:阴性,0分;0-25%,1分;26-50%,2分;51%-75%,3分;>75%,4分。③两项评分乘积:0,阴性;1-4分,弱阳性;5-8分,阳性;9-12分,强阳性。
 
2.4统计学分析
   采用SPSS22.0统计软件包分析数据。采用卡方检验进行各组间的比较。P<0.05表示差异有统计学意义。
 
 
3 结果
3.1  HOXA9在EAOC、EMS组、正常卵巢组中的表达
        HOXA9在EAOC组中的阳性表达率为90.0%(18/20),在EMS组中阳性表达率为 48%(12/25),在正常卵巢中阳性表达率为11%(3/27),阳性表达部位为上皮细胞胞浆。HOXA9在正常卵巢组、EMs组、EAOC组中的阳性表达率依次增高,差异有统计学意义(2 =28.445,P<0.001),各组间差异具有统计学意义(p<0.05)。(表1)
Table 1、 HOXA9 in different kinds of ovarian tissue
Histology N HOXA9  Protein
Expression positive(%) 2 p
- + ++ +++
Nomal ovarian
27 24 3 0 0 11.11 28.445 <0.001
EMS
25 13 6 6 0 48
EAOC 18 2 9 4 5 88.89
阳性表达率:EAOC VS正常卵巢,2=26.186,P<0.001;EAOC VS EMs,2 =7.524  P=0.009;EMs VS正常卵巢,2= 8.441 P=0.004
Table1、 Protein expression of HOXA9 in different kinds of ovarian
 
3.2   HOXA9在EAOC组、卵巢子宫内膜样癌和卵巢透明细胞癌中的表达:   
      HOXA9在的EAOC组中的阳性表达率为90.0%(18/20)。在卵巢子宫内膜样癌阳性表达率为86.2%(25/29),卵巢透明细胞癌阳性表达率为75%(12/16)。HOXA9在卵巢子宫内膜样癌、卵巢透明细胞癌的阳性表达率与EAOC组的差异无统计学意义。(表2,图)。
Histology N HOXA9 Protein 
Expression positive(%) 2 p
- + ++ +++
EAOC 20 2 9 4 5 88.89
OCCC 16 4 2 5 5 75 1.091* 0.296
OEA 29 4 17 4 4 86.21 0.070* 0.791
“*”表示与EAOC组HOXA9阳性表达比较; 
表2、 Protein expression of HOXA9 in different kinds of ovarian carcinoma
 
3.3   HOXA9阳性表达与病理特征的相关性 
      卵巢子宫内膜样癌和卵巢透明细胞癌的HOXA9阳性表达与组织学分级(P > 0.05)、分化程度(P > 0.05)、淋巴结转移均无相关性(P > 0.05),见表 3。
 
 
 
Histology N HOXA9 Preteion
Expression positive(%)
2
p
- + ++ +++
Differentiation
Well-differentiated 9 1 5 1 2 88.89 0.01 0.92
Poorly/moderately-differentiated 16 2 9 4 1 87.5
Clinicopathological staging
I/II 17 4 4 7 2 76.47 0.334 0.684
III/IV 19 3 11 1 4 84.21
Lymphatic metastatic
Negative 30 7 11 8 4 76.67 1.690 0.194
Positive 6 0 4 0 2 100
Table3.reletionship between protein expression of hoxa9 and clinicopathological features of ovarian cancer
 
      
图、HOXA9在卵巢子宫内膜相关疾病中的表达
         图中A 代表EACO组卵巢子宫内膜样癌阳性表达;B代表 EACO组(卵巢透明细胞癌)阳性表达;C代表卵巢子宫内膜样癌阳性表达;D代表卵巢透明细胞癌阳性表达;E.代表EMs组阳性表达;F代表正常卵巢上皮阴性表达;
 
 
4 讨论
 
  子宫内膜异位症(EMs)是指存在于子宫内膜和子宫肌层以外的具有生长功能的子宫内膜组织,包括腺体和间质。子宫内膜异位在孕龄期女性中的发病率约10% ,是一种常见的妇科疾病。虽然本身是良性病变,但子宫内膜异位症具有浸润性癌的几个特点,如细胞浸润,新生血管,扩张持续生长、抗凋亡、潜在的转移和慢性炎症的发生。并且已被报道具有恶变潜能,与上皮性卵巢癌(EOC)产生相关。大量的研究表明,子宫内膜异位症患者患卵巢癌的风险增加。卵巢癌作为恶性肿瘤并不表现为一个同质的群体,而表现为不同组织学亚型,分别具有独特的特性,如频率、疾病的侵袭性,对化疗的敏感性治疗,及恶变的诱因。研究表明子宫内膜异位症的恶变为不同组织学亚型卵巢癌的风险不同。据文献报道子宫内膜异位症患者患特定卵巢癌亚型的风险增加,尤其是子宫内膜样癌和透明细胞癌,[ 7,8-10 ]。在华盛顿州进行的一个以人群为基础的病例对照研究中,卵巢子宫内膜样癌和透明细胞癌患者合并EMs较普通人群高3倍[7],而经手术治疗的EMs妇女患卵巢癌风险减少,进而推测卵巢子宫内膜样癌、透明细胞癌可能由EMs恶变而来。Celeste等人对13例研究的汇总分析发现卵巢子宫内膜癌、透明细胞癌患者中既往患有子宫内膜异位症所在比例远高于其他类型卵巢癌中的比例,结合既往分子生物学研究结果,推测子宫内膜异位症是卵巢透明细胞癌和卵巢子宫内膜样癌的癌前病变[11]。自1925,桑普森首次提出了子宫内膜异位症向卵巢癌的恶性转化,直到70年后,子宫内膜异位症向卵巢癌进展得到分子证据支持。在28例子宫内膜异位症的相关性透明细胞癌应用免疫组化方法检测ARID1A蛋白表达,Yamamoto等人发现17例(61%)患者中ARID1A蛋白阴性表达。在这些情况下,所有非典型子宫内膜异位症和86%典型子宫内膜异位症也无ARID1A 基因表达,提示ARID1A 的缺失表达是恶性肿瘤的发展[12] 的一个非常早期事件。此外,体细胞突变,如PIK3CA、PTEN等可以促进子宫内膜异位症癌变。然而,EMs 恶变的具体机制迄今尚不明确。研究显示,EAOC较其他类型卵巢癌发病年龄早,且血CA125值对于EAOC 敏感度差,不能作为判定有无恶变的决定性因素,因此探讨EMs 恶变的发病机制、寻求更加有效的诊断和治疗方法成为研究热点[13、14、15、16]。
  近年来研究表明,同源框基因HOX与肿瘤关系密切,在肿瘤的发生发展过程中,HOX 基因可以发挥转录激活因子或抑制因子的作用[17] 。HOXA9 基因属于A 簇 HOX 基因,其编码产物是一种重要的转录调节因子,在控制胚胎发育和调节细胞分化过程中发挥重要作用。Cheng 等[18] 研究显示在正常女性生殖道: HOXA9 在输卵管、子宫、阴道上皮表达 ;在女性生殖系统发育的早期,HOXA9、HOXA10、 HOXA13 等 HOX 基因分布无明显特异性,但成人后HOXA9基因则主要分布在输卵管中,表达水平远高于子宫和阴道[19],而在卵巢上皮无表达[11]。既往研究表明HOXA9在EMs患者病灶组织中阳性表达,阳性率66.7%(10/15)。[20] 。本研究中HOXA9在卵巢上皮中阳性表达率为11.1%(3/27,三例均为弱阳性),在EMS组中阳性表达率为 48%(12/25),两者差异有统计学意义(p<0.05),与上述文献相符,推测其可能与EMs的发生有关。 
  目前研究结果表明,HOXA9 基因也参与人类多种恶性肿瘤的发生发展及预后[21.22]。据报道其在急性粒细胞白血病中表达升高[23],与上游一系列蛋白的遗传学改变相关,例如 EZH2、NPM1c蛋白、NUP98-融合蛋白以及MLL-融合蛋白等。同时,HOXA9 编码的转录因子可以直接调控下游的关键靶基因以发挥作用。 HOXA9 在各种肿瘤中的作用不一,在肿瘤发生发展过程中发挥癌基因或抑癌基因的功能[24、25]。我们发现HOXA9在EAOC组和巧囊组的阳性表达率均明显高于正常卵巢组( P <0. 05) ,在EAOC组阳性表达率亦明显高于巧囊组 ( P <0. 05) ,推测HOXA9可能参与了EMs从良性到恶变的转化过程,在卵巢子宫内膜异位症恶变过程中起重要作用。
  越来越多的研究表明: 卵巢透明细胞癌及内膜样癌起源于卵巢子宫内膜异位症,与EMs关系密切。据报道50%或者更多的透明细胞癌伴有EMs,卵巢内膜样癌伴同侧卵巢或盆腔EMs的比率可高达42%。同时,早期位于癌组织原发灶内的EMs病灶可能为随着癌组织的旺盛生长而受到排挤或破坏,从而掩盖了其与内膜异位症发生的关系。结合目前的分子遗传学研究报道,EMs可能是这两类特殊病理类型卵巢癌的癌前病变。为了进一步研究HOXA9与子宫内膜相关卵巢癌关系,本研究增加了16例卵巢透明细胞癌和29例卵巢子宫内膜样癌病例,结果提示卵巢子宫内膜样癌和卵巢透明细胞癌的HOXA9阳性表达率分别为75%和85.2%,与EAOC组差异无统计学意义。同时,EAOC主要病理类型为这两种,本实验中分别占55%(11/20)、30%(6/20)。因此,可以推测这两种亚型卵巢癌来可能源于EMs恶变。EAOC组卵巢子宫内膜样癌和卵巢细胞癌的表达差异无统计学意义,推测这两种癌的发生有着共同的调控基因和传导通路及有相同的起源。  
5 结论
   HOXA9可能与卵巢子宫内膜异位症的发生与恶变有关。
 
 
本研究创新性的自我评价
   
 目前国内外尚无HOXA9对子宫内膜异位症恶变的作用方面的研究,本研究中发现HOXA9与卵巢子宫内膜异位症发生、恶变有关。HOXA9在正常卵巢上皮细胞中不表达,为卵巢子宫内膜样癌和卵巢透明细胞癌及子宫内膜异位症恶变找到了新的基因治疗靶点。
    参考文献
 
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综 述
HOX基因与妇科肿瘤关系的进展
   
 摘要: HOX基因是同源异形盒基因家族的一个亚家族,在进化上高度保守,可通过序列特异性DNA结合活性,参与调控胚胎发育和细胞分化。同时,Hox基因与多种肿瘤的发生发展密切相关,可以导致肿瘤发生或肿瘤的抑制。近来,随着基因组学和生物信息学的发展,HOX基因在调节组织细胞发育及调控其他蛋白表达中的作用机制逐渐阐明,对揭示一系列肿瘤发生的机制具有重要意义,为肿瘤的治疗和新药的开发提供良好的基础。
关键词: HOX基因;转录因子;妇科肿瘤
  Hox基因编码蛋白是调控细胞增殖和分化的重要转录因子,除了参与胚胎和器官发育过程,也参与调节人类多种恶性肿瘤的发生、发展及预后。在肿瘤中的表达往往会根据不同的组织类型与肿瘤部位上升或下调,发挥癌基因或抑癌基因的功能。深入探讨HOX基因在肿瘤发生发展中的调控机制,对于肿瘤的诊断、治疗及预后评估具有指导意义,可为肿瘤的诊断和治疗提供新的靶点。
一、HOX基因的概述:HOX基因最初发现于在果蝇体内,主要调控机体空间结构的正常发育。后于20世纪90年代,HOX基因编码的蛋白产物被证实存在于人在内的脊柱动物中。Hox基因分为 HoxⅠ类和Hox Ⅱ类基因,人类Hox基因家族属于HoxⅠ类基因,共含有39个基因成员,在结构上分A、B、C和D4个簇。各簇分别定位于不同染色体的特定区域。每簇1-13个基因位点沿DNA序列3'→5’依次排列,长约120 kb。HOX基因家族在进化上高度保守,其家族成员均包含一个由183个核苷酸构成的保守序列。这条序列编码的肽链即是同源异型结构域。HOX基因家族依赖同源异型结构域识别和结合特异序列的DNA结构域,调节特异的基因表达以发挥作用。近年来,随着对HOX基因的深入研究,其生物学功能进一步被国内外学者发现。HOX基因在胚胎发育、细胞分化、迁移、凋亡、受体信号转导以及血管生成过程中起到主要调控基因的功能,并与多种恶性肿瘤的发生、病情进展、肿瘤预后转归关系密切[1.2]。HOX基因编码蛋白通过其DNA结合活性及其下游基因转录活性发挥作用。
二、HOX基因的作用机制
  HOX基因依赖同源异型结构域识别和结合特异序列的DNA结构域,调节特异的基因表达以发挥作用。而绝大多数 HOX 蛋白都不能独自结合到靶DNA的“TAAT”序列上。目前研究发现 HOX 基因在发挥作用时结合TALE家族的基因,其中包括 MEISI和PBX两类基因。thorsteinsdottir等人研究发现MEISI 可直接与 HOX基因结合形成异二聚体或与 PBX、HOX 基因结合,形成高度有序的异三聚体复合物,定位到 DNA 特定的位点,从而抑制细胞分化,促进白血病的发生[18]。调控其他基因表达亦是HOX 基因发挥作用的关键环节,目前已知的受其调控的基因包括CBP和 CYBB等。多种 HOX 基因如 HOXB6、HOXAl3可与 CBP 结合,抑制其 HAT 结构活性,封锁体内依赖 CBP- HAT 结构的基因转录。HOXA9、HOXA10 可以在其启动子上形成独联体元件抑制gp91p HOX 转录,进而抑制造血细胞分化。在白血病患者 中可检测到 NUP98-HOXA9 融合基因,该基因慢性粒细胞白血病急性转化中主要起到破坏细胞分化、促进髓系细胞增殖的作用。Richard[19]等人应用PCR测定正常卵巢和卵巢癌细胞株SK-OV3、 OV-90 Hox基因的表达。另外用短肽hxr9扰乱HOX/PBX 二聚体的形成和改变由Hox蛋白的转录调控。在这项研究中发现,卵巢癌衍生株SK-OV3,但不是OV-90,具有Hox基因家族成员高度的表达。通过调整Hox蛋白与PBX之间相互作用可诱导SK-OV3细胞凋亡和抑制体内肿瘤的生长。因此针对Hox / PBX的相互作用是一个潜在的替代或补充现有治疗时发生耐药。
 
三、 HOX基因与妇科肿瘤
   在女性生殖系统的胚胎发育过程中, HOXA9、 HOXA10、 HOXA11、 HOXA13 4 个 HOX 基因沿苗勒管轴均匀表达。随后HOXA9、HOXA10 、HOXA13基因分别分布于输卵管中、子宫、阴道上段,这些 HOX 基因在生殖系统正常发育及生殖系统肿瘤形成过程中发挥重要作用[3]。研究表明,当Hox基因发生异常表达时,在个体发育和组织器官形成过程中就会出现异常的形态结构[4],并可致细胞恶性转化形成肿瘤[3]。 近年来研究发现,在卵巢癌、子宫内膜癌、宫颈癌等妇科肿瘤可检测到Hox基因表达异常。
1  HOX基因与卵巢癌 
   研究表明 HOXA9、 HOXA10 及 HOXA11 在正常卵巢组织中不表达,但在卵巢癌变过程中这些基因异常表达于卵巢表面上皮,分别诱导浆液性、子宫内膜样或黏液样表型的上皮性卵巢癌[3]。有文献报道HOXA9 表达水平与卵巢癌患者生存率密切相关[5],HOXA9在卵巢癌临床标本中高表达与AMS、瘤内调节性T细胞升高及肿瘤浸润CD8淋巴细胞数量下降密切相关。高表达HOXA9的肿瘤患者腹水中免疫抑制细胞因子水平升高。因此,推测HOXA9可能通过旁分泌对腹腔巨噬细胞的作用促进免疫抑制微环境刺激卵巢癌的进展。Ko SY 等人[6]还证实了 HOXA9 与上皮细胞向腹膜播散密切相关,具体机制可能是HOXA9 通过 P-cadherin 促进卵巢癌腹腔种植转移,并推测 HOXA9 促进卵巢癌发展和播散的分子机制可能为 TGF-β诱导的上皮间质转化通路。科学家通过人工合成的短肽干扰 HOX 蛋白与其辅助因子PBX之间的相互作用,发现可有效地诱导卵巢癌细胞凋亡并延缓体内肿瘤的生长[7]。因此,表明针对 HOX/PBX 相互作用是治疗耐药卵巢癌的一个潜在的替换手段。 
2与子宫内膜癌的关系 HOX基因与内膜癌的关系目前国内外均有报道,其中研究较多的是HOXA10。 HOXA10在正常子宫内膜和子宫内膜的发展中起到重要的作用[8]。Lane 等[9]应用免疫组织化学方法检测正常内膜,不典型增生内膜,和子宫内膜样癌各期的 HOXA10 蛋白、雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)表达量, 发现HOXA10在G1子内膜癌中表达与正常内膜,不典型增生内膜无差异,而在G2,G3子内膜癌中表达显著增高,并与ER, PR及 p53 无关。不同的是,目前亦很多研究指出[10、11],子宫内膜癌患者 HOXA10 表达下降,发现子宫内膜癌细胞中HOXA10基因可以通过诱导E-钙粘蛋白表达抑制肿瘤转移发生。不同的是,Zhong 等[11]人发现子宫内膜腺癌中的表达低于正常内膜,且受到性激素的调控。Yoshida 等[10]的 研究也支持这一结论,另外还发现 HOXA10 可以通过下调 Snail 基因诱导子宫内膜癌细胞E-钙黏蛋白的表达抑制肿瘤细胞粘附、转移。该研究亦显示肿瘤组织分级越高,HOXA10 表达下调越明显。有科学家应用原位杂交技术检测正常子宫内膜、子宫内膜腺癌中 HOXD10表达时[12],发现HOXD10基因在子宫内膜腺癌组中表达显著低于正常组,与内膜癌成负相关,且与组织分级有关。Zhao 等[13]将反义HOXB13/PCDNA3.1 质粒转染到转移性子宫内膜样腺癌细胞株,探讨HOXB13 与子宫内膜癌的转移和侵袭关系, 发现90% 的转染细胞侵袭力下降,由此认为 HOXB13 有助于内膜癌 的转移侵袭。 
3 与宫颈癌的关系  Hung[14]等人应用RT-PCR 方法检测正常宫颈上皮及宫颈癌细胞系中DNA 产物含量, 结果发现大部分HOXB族基因在宫颈正常上皮中表达,而其中HOXB2, HOXB4和HOXB13基因只有在肿瘤组织中表达,提示这些基因可能与宫颈癌的发生相关。为确定宫颈癌中39个I型Hox基因的表达模式,Alami[15]分析了正常宫颈组织、宫颈癌细胞系中的基因表达,发现绝大多数(34 /39)Hox基因在正常宫颈上皮表达,而只有Hoxa2,A7,C5,C8和D12沉默,并指出在SiHa宫颈癌细胞系有hoxc5和C8 mRNA的表达,推测HOXc8 和/或hoxc5可能参与宫颈细胞转化过程。应用RT-PCR技术及原位杂交方法检查了来自10例宫颈癌细胞系和9例正常宫颈组织的HOXB基因表达,Lopez等[16]发现 HOXB2,4 和 13 在肿瘤高表达,而正常组织中无表达。近来,有报道指出应用shRNA干扰人宫颈癌HeLa细胞中HOX转录反义RNA的表达后,可显著抑制HeLa细胞的增殖,阻滞细胞周期于G0/G1 期,同时诱导细胞凋亡。这些结果表明,HOX转录反义RNA在宫颈癌的发生和发展中发挥着癌基因的作用[17]。
 
四、展望
  随着分子生物学研究的进一步深入,HOX基因在肿瘤的发生发展中的作用初步得到阐述。实验验证Hox基因通过与DNA 特异性地结合,在胚胎发育、肿瘤发生发展等过程中均起着重要的调节作用,既可通过下游靶基因发挥转录激活或抑制作用,又可与上游一系列调节蛋白相互作用,调控肿瘤的生物学行为。但是现在HOX基因在肿瘤中的研究只是其功能的一小部分,其致瘤的具体分子机制还存在许多未解之谜。进一步研究HOX基因在妇科肿瘤中的作用,有助于更加全面地解释肿瘤的发生机制,为HOX基因能否成为肿瘤早期诊断的分子标志、肿瘤预评估指标、肿瘤分子靶向治疗的靶点提供新的理论基础和研究方向。
 
参考文献
 
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